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技術(shù)文章

四大方案解決液相色譜儀壓力不穩(wěn)問題

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  壓力不穩(wěn)是液相色譜儀(HPLC)常見的故障,其表現(xiàn):
 ?、賶毫υ谝欢螘r間逐漸變化(升高或降低);
 ?、趬毫λ查g變化(>3kg)。
  總結(jié)原因不外乎以下四種情況:⑴有氣泡;(2)漏液;(3)單向閥不良;(4)泵工作相位不正確。
  對于①這種情況:一般是在開機的一段時間內(nèi)出現(xiàn),往往是流動相在色譜柱內(nèi)還沒有平衡好、柱箱溫度還沒有恒定。這些都不屬于儀器問題,只要多平衡一會就會穩(wěn)定。若使用的是梯度程序,由于流動相的比例正處在變化中,壓力也會跟隨變化。
  對于第②種情況:通過下面幾步分析,很快就可以確定原因。
  首先排除氣泡因素:氣泡的產(chǎn)生是由于流動相中溶解了空氣,在泵壓的作用下空氣會分離出來,氣泡留在泵體內(nèi)排不出去,它不僅影響到流量的準確,泵壓也會不穩(wěn),這時我們只要打開排廢閥,利用快速沖洗功能很快就能將氣泡趕出。為防止氣泡產(chǎn)生,好的辦法就是使用在線脫氣裝置。沒有脫氣機時,流動相要經(jīng)過脫氣處理。超聲波震蕩是常用的除氣泡方法,雖然簡單但效果不佳,不妨將流動相用微孔濾膜多過濾兩遍,利用真空泵的負壓,將溶解在流動相中的空氣釋放出來,其效果要好些。如果使用中我們發(fā)現(xiàn),連接過濾頭的輸液管中有微小的氣泡流動時,這說明過濾頭有堵塞現(xiàn)象必須清洗,你可用10%的硝酸進行超聲15分鐘,如果還有氣泡產(chǎn)生那就該換新濾頭了。
  其次,要檢查的是輸液泵有沒有漏液現(xiàn)象,一般接在泵后的管道漏液會使壓力降低,對壓力穩(wěn)定性影響不大。如果泵內(nèi)柱塞墊或柱塞桿磨損了那就不一樣了,它不僅壓力上不去、變化大、流量也不足。只要觀察到泵頭或沖洗管漏液(有沖洗瓶時液位會升高),柱塞墊或柱塞桿肯定有問題。
  第三是單向閥不良,當有鹽份或者雜質(zhì)等污染物附著在單向閥內(nèi)球體和閥體表面時,就會破壞密封性,造成輸液的單向性能降低,泵雖然在工作,但就是輸送不好液體,嚴重時不能輸液。反映到壓力上,表現(xiàn)為嚴重不穩(wěn)或沒有壓力。這時你可以卸下單向閥,用異丙醇超聲清洗20分鐘。如果有鹽份,再用熱水超聲清洗一遍效果會更好。若清洗后還達不到要求,可將單向閥再接到流路上用大流量異丙醇沖洗。單向閥的結(jié)構(gòu)比較精細,如果沒有把握好先不要分解清洗,用超聲波清洗時要注意擺放的位置防止部件震散,否則裝配后效果會不理想。當單向閥內(nèi)的球體損傷時就只有更換了。
  后,引起壓力不穩(wěn)還有一種情況,就是泵工作的相位存在問題,這種情況發(fā)生的比較少,可以通過調(diào)節(jié)泵的初始位置解決。
  以上四個方面基本包含了泵壓不穩(wěn)的所有原因,對于大多數(shù)用戶只要順著這個思路檢查,一般的故障都能得到解決。
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